Givrelle

Лечебно-косметические средства для кожи Givrelle

Компания осуществляет деятельность с 1981 г.

Vitilexine. Регуляция гипопигментации.

ИЗУЧЕНИЕ КОЛИЧЕСТВЕННЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ВТОРИЧНОГО МЕССЕНДЖЕРА:

циклический аденозинмоносфат

ЦЕЛЬ

α-меланоцитстимулирующий гормон имеет определенное количество особых рецепторов.

Рецептор меланокортина-1 (MC1-R) отвечает за несколько модулирующих действий.

Связывание α-меланоцитстимулирующего гормона с MC1-R активирует эффекторную молекулу, аденилциклазу, которая вырабатывает циклический аденозинмоносфат из аденина. Расчет количества циклического аденозинмоносфата позволяет выявить совместимость лиганд по своим рецепторам, а также тесно взаимосвязан с совместимостью активного ингредиента, который был

использован в Vitilexine для MC1-R.

ПРОТОКОЛ

Биологический материал: были использованы человеческие меланоциты (линия клеток M4Be), выражающие MC1-R.

Биометрические материалы α-меланоцитстимулирующего гормона и

α -меланоцитстимулирующий гормон (эталонная молекула) были использованы при конечных концентрациях, равных от 10-7 до 10-11 М. Чтобы избежать распада циклического аденозинмоносфата, использовать ингибиторы с средним содержанием фосфодиэстеразы.

Неспецифическое действие (абсолютный контроль) было предусмотрено форсколином, активатором аденилциклазы. Основная активность была получена от культур, не содержащих форсколин.

Дозировка циклического аденозинмоносфата: Использованный метод включает применение аденина тритиума, меченного радиоактивным изотопом, который был введен в культуру клеток.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Результаты, указанные на рисунке ниже, представляют процентное отношение стимуляции синтеза циклического аденозинмоносфата

Согласно этим результатам и рисунку EC50 (действующая концентрация) была определена: эта концентрация соответствует биометрическому пептиду Vitilexine α-меланоцитстимулирующего гормона или концентрации α-меланоцитстимулирующего гормона, которая вырабатывает 50 % максимальной реакции. Чем ниже EC50, тем лучше совместимость молекулы с этим рецептором.

Эффективная концентрация для стимуляции аденилциклазы (EC50) больше подходит для биометрического пептида Vitilexine α-меланоцитстимулирующего гормона, чем для α меланоцитстимулирующего гормона. Можно сделать вывод, что биометрический пептид Vitilexine α-меланоцитстимулирующего гормона имеет лучшую совместимость, чем α- меланоцитстимулирующий гормон

СТИМУЛЯЦИЯ МЕЛАНОГИНЕЗА МЕЛАНОЦИТОВ

ЦЕЛЬ

Под воздействием меланотропических факторов активность тирозиназы в меланоцитах увеличивается, стимулируя синтез меланина и его передачу через дендриты кератиноцитов. Это исследование было проведено, чтобы продемонстрировать свойства стимуляции биометрического пептида Vitilexine α-меланоцитстимулирующего гормона во время активности тирозиназы, а также синтез меланина в меланоцитах.

ПРОТОКОЛ

Биологический материал: мышиные клетки меланомы (клон Cloudman M6) были использованы для измерения содержания меланина по сравнению с общим содержанием белка. Биометрический пептид Vitilexine α меланоцитстимулирующего гормона был протестирован в диапазоне концентраций от (0,000005 % – 0,0005 % – 0,05 %) по сравнению с α-меланоцитстимулирующим гормоном, эталонной молекулой, протестированным при 10-8 М.

Меланин был испытан после временного приостановления действия осадка в NaOH 1N. Значения меланина были считаны при 436 нм. Белок лизата был испытан с помощью метода Лоури. Принцип этого метода определения концентрации белка состоит в реактивности азота пептида с ионами меди в щелочной среде, а также появлении синего окраса (регистрируется при 436 нм) после каталитического окисления медью ароматических кислот.

Метод Лоури чувствителен к низким концентрациям белка.

Тирозиназа была испытана передачей L DOPA – L-дигидроксифенилаланин (особый субстрат и индикатор активности тирозиназы), наблюдаемой при 475 нм.

Оценка: расчет содержания меланина/единицы массы белка и сравнение этого содержания между контрольными и обработанными культурами.

Мы наблюдали значительную стимуляцию выработки меланина и активность тирозиназы после обработки биометрическим пептидом Vitilexine α-меланоцитстимулирующего гормона. Эта стимуляция более эффективна при использовании биометрического пептида α-меланоцитстимулирующего гормона, чем после обработки α-меланоцитстимулирующим гормоном в этих экспериментальных условиях.

ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТОВ, СТИМУЛИРУЮЩИХ ВЫРАБОТКУ МЕЛАНИНА, НА ЧЕЛОВЕЧЕСКИЕ МЕЛАНОЦИТЫ

ЦЕЛЬ

Целью настоящего исследования было продемонстрировать свойства передачи меланина биометрического пептида Vitilexine α-меланоцитстимулирующего гормона, оценивая его влияние на морфологию меланоцитов в лабораторных условиях.

ПРОТОКОЛ

Биологический материал: человеческие меланоциты (клеточная линия M4Be).

Биометрический пептид Vitilexine α-меланоцитстимулирующего гормона был использован при концентрации 0,05 % для оценки передачи меланосомы.

Гистохимия: клетки были зафиксированы на слайдах и обозначены особым образом отметкой L DOPA – L-дигидроксифенилаланин (особый субстрат и индикатор активности тирозиназы).

Затем слайды были изучены во время микроскопического исследования.

Микроскопическое исследование меланоцитов в течение 24 часов продемонстрировало изменения в характеристиках. При отсутствии стимуляции меланоциты полностью биполярны. При наличии биометрического пептида Vitilexine α-меланоцитстимулирующего гормона они имеют больше дендритов и клеточных тел.

ВЫВОДЫ

Биометрический пептид Vitilexine α-меланоцитстимулирующего гормона приводит к

формированию дендритов, облегчая передачу меланосом (меланина) в коже.